第16章 完美的PCR实验 作者：未知 吴妍知道，周文肯定有特殊的提取手法。 不過见他不愿意說，她也沒有强求，毕竟這是别人的看家本领，泄露出去有害无益。 随后两個人又谈了一下待遇問題，吴妍把之前对石磊說的话，跟周文又讲了一遍，最后笑问道：“你還有什么問題嗎？” 周文想到了任务，說：“能不能问一下，我算是合同工還是正式工啊？” “這個嘛……”吴妍迟疑了一下，她沒想到周文会问這個問題。 现在生物生什么情况，她相信周文心裡应该很清楚，江州市第一人民医院的合同，而且還那么优厚，别說他一個小小的本科生了，即使生物硕士生、博士生，很多人也是求之不得呢。 他居然還想一步登天，直接解决编制問題，真的有些過分了，她自己到现在還是合同工呢。 吴妍想了想說：“一般来說，如果是院裡聘用的话，那肯定是正式工，但你這是检测中心pcr组的聘用合同，所以恐怕只能是合同工了。” “合同工啊……”周文迟疑着。 其实合同工還是正式工，他真得无所谓，只要能让他到检测中心去实习实践，就算临时工他也愿意。 這不是任务要求在一個礼拜内成为正式工嘛，他不能不抻着点。 1000点经验值和1000点积分呢，還有一次开黑铁箱子的机会。 吴妍原本以为事情已经办妥了呢，沒想到這裡又节外生枝了，于是苦口婆心說：“你虽然是合同工，但是待遇是按照正式工来算的，并沒有差在哪裡。 另外嘛，什么事都是一步步来的，你先上班，编制問題等過一段時間再解决也不迟嘛。” 周文笑问道：“你是我学姐，而且也在医院上了一年班了，你說实话，我如果真签了合同工，编制大概什么时候能解决？” “這個嘛……”吴妍有些尴尬，端起咖啡杯掩饰了一下。 等放下杯子后，吴妍說：“那這样吧，我帮你回去问问。但說实话，你不要抱太大期望。” 周文点点头，笑道：“行，那就麻烦学姐了。” “不客气。” 周文那边還在离心呢，也沒有多待，客气了几句便起身离开了。 …… 回到实验室时，杨宇东和顾红云迫不及待的问他面试成功沒有？ 周文笑呵呵的說：“我提了個條件，她說要回去跟领导商量商量，等商量之后再给我准信。” 杨宇东无语道：“條件都那么优越了，你還要提條件啊？” 周文說：“我這不是看机会难得嘛，就想试试他们的底价。” 杨宇东：“……” 他真想用提取枪把周文脑浆抽出来一点，看他脑子裡一天到晚到底在想些什么？ 周文嘿嘿笑着去做pcr实验了。 pcr全称是polymerasechainreaction。 中文名是“聚合酶链式反应”，又称“聚酶链式反应”，是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。 能在一個试管内将所要研究的目的基因或某一dna片段，于几小时内扩增至十万乃至百万倍。 其原理基本与人体细胞内dna复制像似，但反应体系相对简单。 当然了，這不意味着pcr简单。 相反，pcr是非常难的. 首先通過高温“变性”，把一段双链结构的dna解链，变成两條单链结构dna。 之后“退火”，在低温下让“引物”和作为模板的dna互补结合，形成局部双链。 最后中火“延伸”，通過dna聚合酶催化以引物为起始点的dna链产生延伸反应，变成两條双链结构的dna。 接下来不断重复這個過程。 1变2，2变4，4变8，8变16，16变32…… 通過pcr技术，可以从一根毛发、一滴血、甚至一個细胞中扩增出足量的dna供分析研究和检测鉴定。 比如亲子鉴定； 比如疫苗研究； 比如病毒疾病防治； 又或者遗传病研究等等，都需要大量用到pcr。 当然，周文今天做的水稻蚜虫生化试剂实验，其实是沒有必要做pcr的。 蚜虫是一种很低级的虫子，一般直接用药物作用在其身上，然后看它的遗传特性就行了。 之所以還要做pcr，更多的目的也是为了学习pcr。 pcr反应体系包含了水、缓冲液、dntp（脱氧核糖核苷三磷酸）、引物p1p2dna模板以及taq酶。 等一切都准备好之后，周文调节好提取枪的量程，然后提取30μl的水到三组pcr管裡。 吸液的时候严格按照操作规程，垂直吸液、慢吸慢放。 换過枪头后，提取了5毫升的缓冲液到pcr管中。 再分别向管中加入dntpp1p2dna模板…… 得益于這段時間的学习，除了一开始有些紧张外，周文做起来有條不紊。 等所需原料添加完毕后，接下来就是离心了。 按照要求设定好转速后，等了三分钟，离心完成。 周文从离心机裡取出装着混合液的pcr管，立刻放到了pcr仪上，进行扩增。 设定94c预变性4min。 然后设定20次循环扩增阶段。 高温、低温、中温、高温…… 1变2，2变4，4变8，8变16，16变32…… 周文焦急的等待着，心情就像产房外的丈夫一样，心裡默默祈祷着“母子平安”，同时也在想，不知道等会生出来的是男是女？身体健康与否？ 就在這时，周文突然想到系统积分可以加快实验进度，与其在這裡傻等几個小时，要不加快看看？ 反正這裡也沒有人看到。 想到這裡，周文立刻召唤出個人属性頁面，點擊积分后，眼前弹出一個选项。 【請问是否消耗积分加快实验进度？是否】 【是】。 【本次实验加快需要消耗20点积分，請再次確認】 周文见仅仅只要20点积分就能加快实验进度了，那還有什么好犹豫的，立刻選擇了確認。 還不等周文反应過来，下一秒，pcr仪已经完成了扩增。 周文心裡惊讶不已，系统的力量简直神秘莫测。 在心裡感慨了一句，很快他又紧张了起来。 第一次做pcr，不知道能不能成功呢？ 周文打开pcr仪，从裡面取出pcr管。 本来下面是产物分析，不過周文有真视之眼，微微眯起眼睛，很快他便看到了高密度的双螺旋结构的dna。 “perfect~” 要不是戴着口罩，周文就要哈哈大笑了起来。 学生物的有一個算一個，谁不是经過无数次失败后才学会做pcr的，有哪個人能像他一样，第一次做扩增，就一次性成功？ 而且扩增效果出乎意料的好，简直完美。 …… 江州市，第一人民医院，检测中心，pcr组。 吴妍在外面吃過午饭才回到医院，然后第一時間就到组长办公室汇报情况。 “人呢？”正在写实验报告的张曙光，头也不抬的问到。 吴妍有些不好意思的說：“那個……還沒来。” 去的时候她可是拍着胸脯保证說，手到擒来的，结果牛皮吹炸了。 张曙光抬头意外道：“怎么，不愿意来？” 吴妍摇摇头說：“不是，只是他說……” 吴妍把周文的要求跟张曙光讲了一遍。 张曙光拿笔的左手，在办公桌上敲击着，面带微笑的說：“你說你，這么聪明的一個人，怎么关键时候掉链子啊？” 吴妍奇怪道：“我怎么掉链子啦？他要正式工待遇，這個我哪敢越俎代庖，替您答应啊？” 张曙光笑道：“越俎代庖怎么啦，他一個生物本科生，敢狮子大开口跟你要事业编制，难道你就不想想凭什么嗎？” “凭什么啊？”吴妍疑惑了一句，很快便反应過来，惊讶道：“噢~~~你是說……” 张曙光呵呵笑道：“你都上门去找人家了，只要不是太离谱的，你就先答应他嘛，有什么問題回头再讲。口头允诺，又不是打包票的，对不对？” “嗯嗯嗯~老大，我知道错了。”吴妍连连点头，承认错误，“那我现在打电话给他？” 张曙光好笑的摇摇头，“回都回来了，急什么啊，還怕他跑了不成。好歹咱们也是江州一院，不能太让人小瞧了，先抻他两天再說。”